Ląstelių linijos ir ląstelių banko identifikavimas
Ląstelių linijos ir ląstelių banko identifikavimas yra reguliavimo reikalavimas. Ląstelių linijos ir ląstelių bankai, naudojami antikūnų vaistuose, baltyminiuose vaistuose ir ląstelių terapijos produktuose, turi užtikrinti jų kokybę, grynumą ir saugumą. Tinkamas ląstelių linijos ir ląstelių banko identifikavimas yra labai svarbus gaminant biofarmacinius preparatus.
Ląstelių linijos ir ląstelių banko identifikavimo metodai
Ląstelių linijos ir ląstelių banko identifikavimas pirmiausia skirtas pagrindiniams ląstelių bankams (MCB) ir darbo ląstelių bankams (WCB). Be to, prieš įtraukiant į GMP įrenginius MCB gamybai, tyrimų ląstelių bankai (RCB) paprastai tikrinami dėl mikobakterijų ir sterilumo. Gamintojai taip pat gali prašyti atlikti specifinius virusų tyrimus.
Pagal galiojančius reglamentus (pvz., ICH Q5A/Q5B/Q5D), ląstelių linijos ir ląstelių banko identifikavimas daugiausia apima šiuos aspektus: ląstelių identifikavimą, sterilumo tyrimą, mikoplazmos tyrimą, endogeninio ir egzogeninio virusinio užterštumo tyrimus ir navikogeniškumo tyrimus. „HyQure Biotech“ pateikiami testavimo elementai ir metodai aprašyti toliau:
|
Bandymo elementai |
Aptikimo metodai |
|
|
Ląstelių identifikavimas |
Izofermentai, CO1, STR, rūšių identifikavimas |
|
|
Bakterijų ir grybelių tyrimas |
Membraninis filtravimas, tiesioginė inokuliacija ir kvėpavimo signalų metodas |
|
|
Mikoplazmos tyrimas |
Tiesioginės kultūros metodas, indikatorinių ląstelių kultūros metodas, qPCR metodas (mikoplazmos ir spiroplazmos tyrimams) |
|
|
Mikobakterijų tyrimas |
Kultūros metodas, qPCR metodas |
|
|
Egzogeninių ir endogeninių virusinių agentų tyrimai |
Ląstelių morfologijos stebėjimas ir kraujo adsorbcija |
Ląstelių kultūros morfologijos stebėjimas ir kraujo adsorbcijos tyrimas |
|
Įvairių indikatorinių ląstelių sėjimas in vitro |
Citopatinio poveikio tyrimas |
|
|
Gyvūnų ir vištų embrionuotų kiaušinių inokuliacija in vivo |
Embrionuoti vištų kiaušiniai, žindomos ir suaugusios pelės ir kt. |
|
|
Retroviruso testas |
Užkrečiamumo testas, elektroninė mikroskopija, atvirkštinės transkriptazės aktyvumas (TEM-PERT) |
|
|
Konkrečios rūšies{0} virusų tyrimas |
Pelės-kitos, žmogaus-kitos, beždžionės-kitos |
|
|
Galvijų viruso tyrimas |
Citopatinio poveikio tyrimas, qPGR metodas |
|
|
Kiaulių viruso tyrimas |
Citopatinio poveikio tyrimas, qPGR metodas |
|
|
Kiti specifiniai virusų tyrimai |
Pelės parvoviruso testas ir kt. |
|
|
Tumorogeniškumo tyrimas |
Eksperimentai su gyvūnais |
|